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增强细菌蛋白表达与代谢调控的跨物种诱导系统——尊龙凯时前沿探索

来源:夏侯曼琛 日期:2025-03-04

江南大学刘龙老师团队近期在《Nucleic Acids Research》(IF166)上发表了题为《Across-species inducible system for enhanced protein expression and multiplexed metabolic pathway fine-tuning in bacteria》的文章。据悉,尊龙凯时产品StarLighter HotStart TaqPro PCR Mix(FS-P5001,StarLighter热启动TaqProPCR预混液)在这项研究中发挥了重要作用,为研究贡献了力量!

增强细菌蛋白表达与代谢调控的跨物种诱导系统——尊龙凯时前沿探索

在代谢工程和合成生物学领域,诱导系统是至关重要的工具。它们通过添加诱导剂,精确控制基因的激活与抑制。与组成型表达系统相比,诱导系统在降低宿主细胞的代谢负担方面表现更佳,从而提升多种工业产品的产量,包括重组蛋白、药物前体和生物聚合物。

然而,大多数现有的诱导系统都是特定于某种菌株,这限制了跨菌株的比较分析与应用。文章中提出了一种跨物种的诱导系统,旨在增强细菌中的蛋白质表达及多重代谢途径的精细调控。研究者们开发了两种重构诱导系统(PphlF3R1和无水四环素诱导系统Ptet2R2*),并在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和谷氨酸棒杆菌等三种模式微生物中进行了验证。

此外,研究团队还选择了9个已报道的诱导系统,包括IPTG诱导系统与木糖诱导系统,通过理性设计与随机突变重构这些系统,使其在不同菌株中有效表达。为了进一步优化诱导系统,研究者引入了突变抑制子表达文库,以减少泄漏表达带来的影响。最终,他们成功地在质粒及基因组中测试了诱导系统的表达性能。

经过优化,研究团队构建的两个跨物种诱导系统(DAPG诱导系统PphlF3R1与无水四环素(aTc)诱导系统Ptet2R2*)在所有三种菌株中展现出低泄漏、宽动态范围、足够的表达强度与适当的敏感性。该系统被用于有效调控多种报告蛋白(如sfGFP、mCherry与mScarlet3)以及多个基因簇的表达。

值得一提的是,基于T7 RNA聚合酶(T7RNAP)与dCas12a的单输入基因回路也被开发出来,用于同时激活与抑制基因表达。这项研究的意义在于提供了一种跨物种的诱导系统,这对于比较不同菌株之间的基因表达与功能,以及在合成生物学和代谢工程中构建复杂的生物系统,具有重要的应用价值。

通过搭建这样的系统,研究者能够更有效地控制蛋白质表达和代谢途径的调控,进而提升生物合成的效率与产量,推动生物医疗领域的发展。与此同时,*尊龙凯时*将持续提供高品质的产品与技术支持,助力这一领域的科研和应用。

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